اولین بار در سال 1965 دانشمندان آلمانی و آمریکایی
توانستند با استفاده از فنول ، اسید نوکلئیک و پروتئین ویروسی را از یکدیگر
جداسازی نمایند . سپس هر کدام از این ترکیبات را جداگانه بر روی گیاهان تلقیح
نمودند و  مشاهده شد که اسید نوکلئیک است
که می تواند باعث تکثیر ویروس در داخل گیاه شده و آلودگی به وجود آورده ، سبب بروز
علائم گردد. در سال ها ی اخیر روش های زیادی جهت جداسازی اجزای تشکیل دهنده ی
پیکره های ویروسی ابداع شده است


برخی از این روش ها عبارتند از : 1.استفاده از
فنول  2.استفاده از شوینده ها  3 .استفاده از مواد آلی 4.استفاده از گرما
5.استفاده از مواد تجزیه کننده ی اسمزی 
6.استفاده از اسیدها و بازها  7.
استفاده از شیب چگالی

مراحل کار

  1. 200 میکرولیتر از ویروس خالص و 800 میکرولیتر
    اسید استیک را با هم مخلوط می کنیم و سپس در یک اپندورف می ریزیم.
  2. به مدت 5 دقیقه با 5000 دور سانتریفیوژ می
    کنیم.
  3. RNA
    رسوب می کند و محلول رونشین را که حاوی پروتئین و اسید استیک است، که در یک
    اپندورف جدا ریختیم.
  4. رسوب را 2 مرتبه با اسید استیک و 2 مرتبه با آب
    مقطر استریل شستیم .
  5. حال اپندورف حاوی RNA را
    5 دقیقه با 5000 دور سانتریفیوژ می کنیم.
  6. برای خارج کردن آب داخل اپندورف آن را به صورت
    وارونه بروی دستمال کاغذی قرار می دهیم.
  7. سپس 10 میلی لیتر NaOH  2/0 درصد و یک میلی لیتر آب مقطر استریل را به
    رسوب RNA
     اضافه می کنیم تا حل شود.
  8. اپندورف را در فریز 20- قرار می دهیم.

حال برای جدا و خالص سازی پروتئین این مراحل را
شروع می کنیم

  1. لوله دیالیز را درون آب مقطر می گذاریم تا نرم
    شود

10. یک سمت لوله را گره می زنیم و تیوب را که
حاوی پروتئین و اسید استیک است را یه کم هم زده و در داخل لوله می ریزیم، و سمت
دیگر را با نخ می بندیم همه محلول را پایین نگه می داریم. این کار برای این است تا
اسید استیک را از پروتئین جدا کنیم.

11. حال لوله را که محتوی محلول است را درون 5/0
لیتر بافر که بروی همزن مغناطیسی است (فسفات 01/0 مولار با 7PH= )قرار
می دهیم.

12. دو بار با فاصله یک ساعت بافر را عوض می
کنیم، و سپس برای مدت یک شب می گذاریم بماند.

بعد از انجام مراحل فوق و گذشت یک شب ، بافر
فسفات جایگزین اسید استیک خواهد شد . محلول موجود در لوله ی دیالیز به اپندورف
هایی منتقل گردید و سپس میزان جذب و خلوص آن ، از طریق اسپکتروفوتومتر اندازه گیری
شد .